Genetski modificirane imunološke stanice pokazuju potencijal za sprječavanje odbacivanja organa

U časopisu Frontiers in Immunology predstavljena je stanična terapija koja može "razoružati" visoko imunološki senzibilizirane pacijente prije transplantacije organa. Znanstvenici su konstruirali regulatorne T stanice (Treg) s himernim receptorom anti-HLA antitijela (CHAR) - u biti, s "mamcem" HLA-A2 proteina koji uključuje Treg kada je u kontaktu s B stanicama koje proizvode anti-HLA-A2 antitijela. In vitro, ovi CHAR-Tregovi prepoznali su i potisnuli proizvodnju IgG visokog afiniteta u presenzibiliziranim pacijentima, a istovremeno zadržali "identitet" Tregova (FOXP3/HELIOS) i ne ubijajući ciljne stanice. To pruža priliku za ciljanu desenzibilizaciju bez potpune imunosupresije.

Pozadina studije

U transplantologiji, glavni „sukob interesa“ su antitijela protiv HLA antigena donora. Nakon transfuzija, trudnoća ili prethodnih transplantacija, primatelj često razvija senzibilizaciju: anti-HLA IgG i memorijske B-stanice, spremne za brzo „rastvaranje“, već cirkuliraju u krvi. Takvi pacijenti su manje kompatibilni, dulje čekaju na organ i imaju veći rizik od akutnog i kroničnog odbacivanja antitijela. Standardni protokoli desenzibilizacije (plazmafereza/imunoadsorpcija, visoke doze IVIG-a, rituksimab, inhibitori proteasoma, imlifidaza) djeluju široko i grubo: smanjuju ukupni skup antitijela ili stanica, ali ne ciljaju specifične „opasne“ klonove i popraćeni su toksičnošću i infektivnim rizicima.

Imunološki sustav ima vlastitu "kočnicu" - regulatorne T stanice (Treg), koje održavaju toleranciju na "strano". Posljednjih godina Treg terapija postala je prava klinička strategija, ali u "zadanoj" verziji je neselektivna: ubrizgane stanice ne razlikuju protiv kojeg se antigena razvija reakcija. Stoga istraživači pokušavaju "pričvrstiti metu" - opremiti Treg stanice umjetnim receptorima koji se aktiviraju samo kada naiđu na pravi signal. Tako je nastala ideja o himernim receptorima (sličnima CAR tehnologijama), ali sastavljenima ne na temelju anti-CD19, već iz domena samih HLA molekula, tako da se Treg stanice aktiviraju u blizini B stanica koje proizvode odgovarajuća anti-HLA antitijela.

Kritični zahtjevi za takve "ciljane" Treg-ove su dvostruki. Prvo, moraju ostati pravi Treg-ovi (održavati FOXP3/HELIOS i supresorske programe), bez probijanja efektorskog fenotipa na pozadini jake stimulacije. Drugo, njihovo djelovanje mora biti ciljano: precizno suzbijanje alospecifičnih B-klonova i plazmablasta, minimalno ometanje ostatka imunološkog sustava, kako se ne bi povećali troškovi liječenja infekcijama i rizici od tumora. Ako se ovaj problem riješi, pojavit će se metoda za meku, preciznu desenzibilizaciju prije transplantacije i smanjenje potrebe za potpunom imunosupresijom nakon nje.

Konačno, praktični kontekst: kod nekih pacijenata senzibilizacija je usmjerena na jedan ili dva „problematična“ alela (npr. HLA-A2), a upravo oni blokiraju pristup organima. Stanična terapija usmjerena na takva „uska grla“ može proširiti skupinu kompatibilnih donora, ubrzati transplantaciju i smanjiti učestalost odbacivanja antitijela - posebno kod djece i kod primatelja s dugotrajnim „povijesnim“ kontaktom sa stranim HLA (višestruke transfuzije, ponovljene transplantacije). Stoga je dokaz principa za anti-HLA-inducirane Treg-ove važan korak prema personaliziranoj imunomodulaciji u transplantologiji.

Kako je nova ćelija strukturirana

• Konstrukcija: izvanstanična domena HLA-A2 + zglob CD8 + transmembranski CD28 + signalizacijski "tandem" CD28-CD3ζ. Ovaj receptor se aktivira kada se na površini B-stanice nalazi anti-HLA-A2 antitijelo.
• Specifičnost: CHAR-Treg „počinju“ specifično na anti-A2 B-stanicama, bez utjecaja na druge imunološke sustave.
• Safe Treg profil: nakon aktivacije ne gube linijske markere (FOXP3, HELIOS), tj. ostaju „kočnice“ i ne pretvaraju se u „gas“.
• Necitotoksično: Za razliku od modificiranih konvencionalnih CD4 T stanica s istim receptorom, CHAR-Treg ne ubijaju anti-A2 stanice, već potiskuju njihovu funkciju.

Što je točno provjereno?

• Ex vivo model pacijenta: Mononuklearne stanice krvi pacijenata presenzibiliziranih HLA-A2 su pripremljene stimulusima (HLA-A2-K562), zatim su dodani CHAR-Treg i izmjereni su IgG (ELISA) i sastav B-stanica (spektralna protočna citometrija, UMAP).
• Rezultat: nakon 48 sati i 5 dana, proizvodnja IgG je značajno smanjena (u 2 od 3 uzorka pacijenata), udio B stanica općenito se smanjio bez očitog „izbora“ između podtipova (naivni, memorijski, marginalna zona, plazmablasti).
• Autorovo tumačenje: Osjetljivost testa može se povećati anti-A2-specifičnim ELISA testom i odvojenom procjenom IgG klasa; potrebno je testiranje na većem broju pacijenata i za druge HLA alele (npr. A24).

Zašto je ovo važno za transplantaciju?

Danas 20% primarnih i do 75% ponovljenih primatelja već ima anti-HLA antitijela, što dramatično sužava skupinu prikladnih donora i potiče visoke doze imunosupresije. Neselektivni protokoli desenzibilizacije (plazmafereza, "nuliranje" B-stanica) ne funkcioniraju glatko i prepuni su komplikacija - od infekcija do nefro- i neurotoksičnosti (osobito kod djece). Ciljane Treg stanice, koje djeluju samo protiv "opasnih" B-klonova, teoretski omogućuju prošireni pristup organima i smanjenu ukupnu toksičnost nakon transplantacije.

• Ključne potencijalne koristi:
  • Prije transplantacije: „ukloniti“ senzibilizaciju na specifični HLA i učiniti pacijenta usporedivim s nesenzibiliziranim pacijentom.
  • Nakon transplantacije: smanjiti doze osnovne imunosupresije i rizike kroničnog odbacivanja antitijela.
  • Nakon transplantacije: Pristup ima potencijalnu primjenu kod HCV-a, pa čak i u slučajevima pobačaja gdje majka razvije antitijela na očev HLA.

Što kažu sami autori i novinski članci

Tim MUSC-a (SAD) naziva rad „prvim korakom prema ciljanoj imunosupresiji: suzbijanjem upravo onih B stanica koje ugrožavaju transplantaciju, a ostatak imunološkog sustava ostavlja na miru.“ Objava naglašava potencijal smanjenja nuspojava i „izjednačavanja uvjeta“ za one kojima je transplantacija trenutno gotovo nemoguća zbog teške senzibilizacije.

Gdje su granice i što je sljedeće?

• Ovo je in vitro/ex vivo dokaz principa na malom broju uzoraka pacijenata: prerano je govoriti o kliničkoj primjeni. Potrebna su prva ispitivanja na ljudima, validacija za različite HLA i detaljna mehanistika (sekrecioni faktori, supresija ovisna o kontaktu, CHAR-Treg transkriptomika).
• Važno je razraditi specifičnost i sigurnost: osigurati da je supresija strogo usmjerena na antigen i da ne remeti druge grane imuniteta.

Što treba zapamtiti

• Treg stanice konstruirane s HLA-A2 "mamcem" prepoznaju i potiskuju B stanice koje su opasne za transplantaciju.
• In vitro, smanjuju proizvodnju IgG kod senzibiliziranih pacijenata i održavaju stabilnost Treg fenotipa bez citotoksičnosti.
• Ovo je ciljana alternativa neselektivnoj desenzibilizaciji, s potencijalom za smanjenje doza imunosupresije i proširenje pristupa transplantacijama. Sljedeći korak su klinička ispitivanja.

Izvor: Valentín-Quiroga J. i dr. Himerne ljudske regulatorne T stanice konstruirane s anti-HLA receptorom antitijela potiskuju aloantigen-specifične B stanice kod prethodno senzibiliziranih primatelja transplantata. Frontiers in Immunology, objavljeno 15. kolovoza 2025. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385