Medicinski stručnjak članka

Genetski

Nove publikacije

Analiza polimorfizma duljine restrikcijskog fragmenta

Alexey Portnov , Medicinski urednik
Posljednji pregledao: 23.04.2024

Svi iLive sadržaji medicinski se pregledavaju ili provjeravaju kako bi se osigurala što je moguće točnija činjenica.

Imamo stroge smjernice za pronalaženje izvora i samo povezujemo s uglednim medijskim stranicama, akademskim istraživačkim institucijama i, kad god je to moguće, medicinski pregledanim studijama. Imajte na umu da su brojevi u zagradama ([1], [2], itd.) Poveznice koje se mogu kliknuti na ove studije.

Ako smatrate da je bilo koji od naših sadržaja netočan, zastario ili na neki drugi način upitan, odaberite ga i pritisnite Ctrl + Enter.

Široka upotreba raznih restrikcijskih endonukleaza za analizu kromosomske DNA otkrila je veliku varijabilnost u ljudskom genomu. Čak i male promjene u kodiranju i regulatornih područja strukturnih gena može dovesti do prestanka određenog sinteze proteina ili gubitak njegove funkcije u ljudskom tijelu koji obično utječe na fenotip pacijenta. Međutim, oko 90% humanog genoma sastoji nekodirajućem sekvence koje su hlapljive i pružaju više tzv neutralnim mutacija ili polimorfizama i nemaju ekspresiju fenotipski. Takva polimorfna mjesta (loci) koriste se u dijagnostici nasljednih bolesti kao genetičkih markera. Polimorfni lokusi prisutni su u svim kromosomima i povezani su s određenom regijom gena. Lokalizacija polimorfnih lokusa, može se postaviti s kojima je genom je povezan mutaciju koja je uzrokovala bolest u bolesnika.

Kako bi se izolirale polimorfne regije DNA, koriste se bakterijski enzimi - restrikcijski enzimi, čiji proizvod su restrikcijska mjesta. Spontane mutacije koje se javljaju u polimorfnim mjestima čine ih otporne ili, obrnuto, osjetljive na djelovanje specifičnog restrikcijskog enzima.

Mutacijska varijabilnost u restrikcijskim mjestima može se detektirati mijenjanjem duljine ograničenih DNA fragmenata, razdvajanjem pomoću elektroforeze i kasnije hibridizacije s specifičnim DNA probama. U nedostatku ograničenja na polimorfnom mjestu, na elektroforemrama će se detektirati jedan veliki fragment, a ako je prisutan, bit će prisutan manji fragment. Prisutnost ili odsutnost restrikcijskih mjesta u identičnom loci homolognih kromosoma omogućuje dovoljno pouzdano označiti mutanta i normalan gen i pratiti njegov prijenos na potomstvo. Dakle, kada je DNK istraživanje pacijenata u oba kromosoma koje postoji ograničenje mjesto u polimorfnih regiji na electrophoregram će prepoznati kratke fragmente DNA. Pacijenti homozigota za mutacije, što mijenja polimorfnih ograničenje stranica će se identificirati fragmenti veće dužine i heterozigoti - kratke i duge fragmenata.

trusted-source [1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

Translation Disclaimer: For the convenience of users of the iLive portal this article has been translated into the current language, but has not yet been verified by a native speaker who has the necessary qualifications for this. In this regard, we warn you that the translation of this article may be incorrect, may contain lexical, syntactic and grammatical errors.